Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JORDANA DANTAS RODRIGUES REIS
DATA: 20/11/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Sala de Teleconferência do RENORBIO
TÍTULO: Desenvolvimento de ferramentas moleculares para o diagnóstico e genotipagem de papilomavírus canino
PALAVRAS-CHAVES: papilomavírus canino, diagnóstico molecular, genotipagem, desenvolvimento
PÁGINAS: 75
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
SUBÁREA: Genética Molecular e de Microorganismos
RESUMO:

O papilomavírus canino (CPV) é o agente etiológico da papilomatose viral canina, que afeta os cães comneoplasias epiteliais benignas (papilomas e placas pigmentadas), com possível progressão para o câncer(carcinoma de células escamosas - CCE); observando-se que as lesões podem diferir de acordo com avariabilidade genética do vírus. O CPV possui 24 tipos, distribuídos em três gêneros: oChipapillomavirus (ChiPV) que está relacionado com as placas pigmentadas; o Lambdapapillomavirus(LambdaPV) e Taupapillomavirus (TauPV) com os papilomas orais e cutâneos. Para o diagnósticomolecular do vírus, já foram utilizados primers degenerados, como: o CP4/CP5, FAP59 /FAP64,MY09/11 e CanPVf/FAP64. Mas até o momento, não existem primers de detecção geral e nem umconjunto de primers específicos que tenham sido desenhados especificamente para a detecção do CPV, oque diminui a eficácia na identificação dos seus diferentes tipos, devido à alta heterogeneidade dassequências de nucleotídeos desse vírus. Por isso, esse estudo tem como objetivo desenvolver novasferramentas moleculares de diagnóstico e genotipagem de CPV. E para o desenvolvimento destasferramentas, foram utilizados métodos de Bioinformática baseados nas sequências de nucleotídeos dogene L1 do CPV1 ao 23, obtidas a partir do banco de dados Papillomavirus Episteme (PaVE). Primeiro,o método baseado na entropia de Shannon, que detecta regiões conservadas e informativas do genoma,foi utilizado para o desenho dos primers degenerados. Em seguida, para o desenho dos primersespecíficos utilizou-se o software Primer3plus. Os 23 pares de primers foram divididos em cinco blocos.Dois blocos foram testados em 33 amostras biológicas, assim como os diferentes primers degeneradosdescritos na literatura. Tirando o MY09/11, que não amplificou nenhuma amostra; os demais primersdegenerados amplificaram todas as amostras, que foram identificadas por genotipagem como CPV1. Osprimers degenerados: Entro_CPVF/Entro_CPVR, desenhados neste estudo, até o momento, foramvalidados filogeneticamente, mostrando-se conservados para a amplificação dos diversos tipos de CPV,diferentemente dos primers já conhecidos. Para o multiplex, os blocos I e II foram padronizados etestados, identificando a coinfecção entre CPV1 e CPV6, em todas as amostras; e a coinfecção entreCPV1, CPV6 e CPV19, para a amostra 20. O bloco IV amplificou o CPV20 na amostra 9. Comparandocom a literatura, é o primeiro relato de coinfecção entre esses tipos. O CPV6 nunca tinha sidoidentificado em papilomas orais e em casos de CCE. E é o segundo trabalho a detectar o CPV19 e oCPV20. No Brasil, é o primeiro relato de múltiplas infecções por CPV, destacando a coinfecção doCPV1 e CPV6 em dois casos de CCE oral. Para HPV as múltiplas infecções estão associadas asgravidades das lesões, estando envolvidas nos casos de câncer. Este resultado destaca a importância dese utilizar diferentes estratégias de diagnóstico para a detecção do CPV, assim como de se utilizarprimers específicos para a detecção de múltiplas infecções, possibilitando a identificação mais eficaz dosdiferentes genótipos envolvidos nas neoplasias epiteliais benignas e no câncer.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2026761 - MARCUS VINICIUS DE ARAGAO BATISTA
Interno - 2022042 - DANIEL PEREIRA DA SILVA
Externo ao Programa - 1897681 - LUCIANE MORENO STORTI DE MELO
Externo à Instituição - FERNANDA LAYS SOUZA GOES SANTOS