Associação entre o extrato aquoso e o óleo essencial do Cymbopogon Citratus e o 5-fluorouracil na resposta antitumoral em camundongos com sarcoma 180, Ingrede Tatiane Serafim Santana, São Cristóvão, 2022.

No tratamento oncológico, a terapia sistêmica quimioterápica continua a ser a mais prevalente, utilizando de antineoplásicos como o 5-Fluorouracil (5 – FU). No entanto, em virtude de apresentar limitações, como a não especificidade celular e efeitos adversos associados, o uso de terapias alternativas, como plantas medicinais, tem sido gradativamente observado entre pacientes oncológicos, com a finalidade de amenizar efeitos adversos da quimioterapia, como náuseas e vômitos, entre outros. O Cymbopogon Citratus, popularmente conhecido por capim santo, capim limão ou capim-cidreira, está entre as plantas medicinais utilizadas por pacientes oncológicos; no entanto, apesar da identificação de propriedades benéficas em seu uso, a associação de suas preparações (como extratos e óleos essenciais) com antineoplásicos é pouco explorada. Nesse sentido, o presente estudo teve por objetivo investigar a associação entre o extrato aquoso e o óleo essencial do Cymbopogon Citratus e o 5-fluorouracil na resposta antitumoral em camundongos com Sarcoma 180. Trata-se de estudo experimental aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Animais (CEPA), pareceres nº 17/2019 e nº 2726280621. Análise cromatográfica foi realizada para identificação de constituintes do extrato e do óleo essencial do Cymbopogon Citratus. Ensaios in vitro foram realizados para avaliação da citotoxicidade em linhagens tumorais do câncer de pulmão (A549), melanoma (B16- F10) e glioma (C6), utilizando o método Suforrodamina B, e para avaliação da atividade hemolítica em eritrócitos, através de ensaio de hemólise. A avaliação da associação do extrato aquoso do Cymbopogom Citratus (EACC) e do óleo essencial do Cymbopogon Citratus (OECC) com o 5 – FU foi realizada em ensaios in vivo utilizando o tumor experimental Sarcoma 180 em protocolo de 9 dias (1º dia - inoculação do tumor S180 na região axilar esquerda; 2º ao 8º dia - Tratamentos por via oral (EACC, OECC e veículo) ou intraperitoneal (5 - FU), 9º dia - coleta de material sanguíneo, órgãos (fígado, rins e baço) e tumores a serem analisados); análises adicionais também foram realizadas com o citral, constituinte identificado como majoritário do OECC; as doses utilizadas corresponderam a 50 e 100 mg/kg/dia para o EACC, 25 e 50 mg/kg/dia para o OECC e para o citral e 25 mg/kg/dia para o 5 - FU. Os parâmetros avaliados frente a associação do EACC, OECC ou do constituinte isolado citral com o 5 – FU incluíram a inibição tumoral e aspectos toxicológicos relacionados a massa corpórea, ingesta de água e consumo de ração, massa dos órgãos, parâmetros bioquímicos renais (ureia, creatinina e ácido úrico) e hepáticos (alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase e fosfatase alcalina), parâmetros hematológicos eritrocitários (hemácia, hemoglobina e hematócrito) e leucocitários (leucócito total e diferencial) e análise morfológica dos órgãos. Análises estatísticas incluíram a regressão não-linear para determinação da concentração inibitória média capaz de produzir 50% do efeito máximo em ensaio in vitro, o teste de normalidade de Shapiro wilk, a análise de variância de uma e duas vias e o pós teste de Tukey; as análises foram realizadas utilizando o programa Prisma versão 8.0.2 (GraphPad Software). Análise cromatográfica identificou que o ácido clorogênico está presente no EACC e que o citral representa o constituinte majoritário do OECC. Ensaios in vitro evidenciaram que o EACC apresentou fraca atividade citototóxica para as linhagens tumorais da A549, B16-F10 e C6, com grau de inibição celular (G%) < 50%; por sua vez, o OECC e o citral apresentaram alta citotoxicidade para as linhagens avaliadas, com %GI > 75%; adicionalmente, o OECC apresentou concentração inibitória capaz de provocar 50% do efeito máximo (CI50) < 30 μg/mL para as linhagens da A549 e B16-F10, considerado promissor para a descoberta de novas drogas oncológicas. Ensaio de hemólise identificou que o EACC apresentou leve toxicidade a eritrócitos na concentração de 1000 μg/mL; por sua vez, o OECC e o citral apresentaram toxicidade nas concentrações de 500 e 1000 μg/mL e leve toxicidade na concentração de 250 μg/mL. Ensaio in vivo, para investigação da associação do EACC, OECC e do citral com o 5 – FU, identificou que não houve influência significativa da associação em relação a inibição tumoral do S180 quando comparado ao tratamento com o antineoplásico de forma isolada. No experimento com EACC, o tratamento do S180 com 5 – FU apresentou crescimento tumoral de 0,36 ± 0,07 g e os tratamentos com EACC 50 e 100 mg/kg/dia + 5 – FU de 0.67 ± 0.08 g (p=0,3532) e 0.57 ± 0.06 (p=0,7539), respectivamente. No experimento com OECC e com o constituinte isolado citral, o grupo 5 – FU apresentou crescimento da massa tumoral de 0,22 ± 0,04 g, os grupos tratados com 25 e 50 mg/kg/dia do OECC + 5 - FU de 0,55 ± 0,13 g (p=0,3235) e 0,24 ± 0,07 g (p>0,9999) e para o citral 25 e 50 mg/kg/dia + 5 – FU de 0,28 ± 0,04 g (p=0,9971) e 0,22 ± 0,06 g (p>0,9999), respectivamente. Análises toxicológicas identificaram que a associação do EACC com o 5 – FU resultou em alterações em parâmetros bioquímicos renais; elevação de ácido úrico foi identificada frente a associação de EACC 100 mg/kg/dia com o 5 – FU e redução da creatinina foi identificada frente a associação entre o EACC 50 e 100 mg/kg/dia com o 5 - FU, sugerindo que apesar da presença de elevação de ácido úrico, papel nefroprotetor pode estar presente ao reduzir valores de creatinina em relação ao grupo tratado apenas com 5 – FU. No uso do OECC 50 mg/kg/dia com o 5 - FU, elevação da ingesta de água foi encontrada quando comparado ao tratamento isolado do 5 – FU, mas sem diferença estatística com o controle negativo com tumor, sugerindo a preservação dos hábitos de ingesta de água alterados pelo 5 - FU; não foram identificadas alterações toxicológicas relacionadas a associação do constituinte isolado citral com o 5 – FU. Desse modo, os achados encontrados salientam que o OECC apresenta papel promissor frente as linhagens da B16-F10 e da A549, que pode estar relacionado, principalmente, ao citral, identificado como constituinte majoritário do OECC e com elevada citotoxicidade frente as linhagens tumorais; no entanto, a presença de atividade hemolítica no OECC em concentrações => 250 μg/mL pode representar uma limitação em seu uso e deve ser considerado em análises posteriores. Adicionalmente, a associação do EACC, OECC e do citral com o antineoplásico 5 – FU concluiu que não houve influência da associação frente a inibição tumoral do S180, nas doses utilizadas no presente estudo, e que alterações podem ocorrer na ingesta de água frente o tratamento associado do OECC com o 5 - FU e em parâmetros renais frente o tratamento associado do EACC com o 5 – FU, na terapêutica oncológica.