Banca de QUALIFICAÇÃO: ROSANA MOURA ANDRADE
13/12/2021 08:14
A própolis é um produto natural produzido pelas abelhas para vedar espaços e envolveranimais invasores, evitando a decomposição e o desenvolvimento de microrganismos patogênicos nacolmeia. Os seres humanos utilizam a própolis há muito tempo para tratar problemas de saúde, comoas infecções microbianas, sobretudo do trato respiratório superior. Entre os microrganismoscausadores dessas infecções encontram-se as bactérias do gênero Streptococcus, como por exemplo,Streptococcus mutans. O biofilme produzido por estes microrganismos é um dos importantes fatoresde virulência deste patógeno, uma vez que o protege da ação de fármacos e antissépticos, dificultandoa sua eliminação. Nesse sentido, tratamentos utilizando produtos naturais antibacterianos que inibem aformação do biofilme podem ser utilizados como alternativa para prevenir ou tratar doençasinfecciosas. Propõe-se, neste trabalho, isolar de maneira bioguiada, metabólitos secundários daprópolis marrom capazes de inibir o crescimento microbiano de Streptococcus mutans, bem como,avaliar a atividade antibacteriana dessas substâncias frente Streptococcus agalactiae, Streptococcusgordonii e Streptococcus pyogenes. O extrato da própolis marrom, coletada no município deTucano/BA, foi obtido por maceração/ultrassom. Em seguida o extrato bruto foi fracionado porpartição líquido-líquido utilizando hexano, diclorometano e acetato de etila. Os compostos fenólicos(CFT) e flavonoides totais (FT) foram quantificados por métodos colorimétricos utilizando o reagentede Folin-Ciocalteu e AlCl3, respectivamente. A determinação da atividade antimicrobiana foi realizadaem placas de 96 poços utilizando o método da microdiluição, e a avaliação da formação de biofilmepelo método do cristal violeta. A fração com maior potencial de inibição do crescimento de S. mutansfoi submetida à cromatografia líquida clássica (CLC) e posteriormente será submetida à CLAE para apurificação dos metabólitos secundários. Finalmente, os metabólitos secundários isolados serãoavaliados quanto ao seu efeito de inibição do crescimento e na inibição da formação de biofilme de S.agalactiae, S. gordonii e S. pyogenes. A elucidação estrutural das substâncias isoladas será realizadapor Ressonância Magnética Nuclear (RMN). O processo extrativo rendeu 82,07 g de extrato bruto, oque representou 47,72%. A fração diclorometano apresentou 143,9 mg/g (± 4,13) de CFT e 452,7 mg/g(± 1,76) de FT representando a maior concentração dentre as frações. Os resultados obtidos para osensaios biológicos evidenciam que o extrato bruto apresentou concentração inibitória mínima (CIM)de 512 µg/mL, frente S. mutans. A fração diclorometano foi a mais ativa frente S. mutans, com CIMde 256 µg/mL, enquanto, a CIM da fração hexano foi de 512 µg/mL. Deste modo, a fraçãodiclorometano foi submetida ao processo de isolamento dos metabólitos secundários por CLC, dando origem a 9 subfrações. Destas frações, as frações SBF-7 e SBF-8 (cristais amarelos) foram as mais ativas contra S. mutans apresentando ambas CIM de 128 µg/mL. Com os achados, foi possível concluir que dentre as frações testadas a fração diclorometano foi a mais potente contra S. mutans e por isso, esta fração foi selecionada para o isolamento biomonitorado da(s) substância(s) responsáveis pelo efeito antimicrobiano. Espera-se descobrir novas substâncias naturais com potencial antimicrobiano a partir de uma fonte que já é utilizada tradicionalmente para o tratamento e prevenção de infecções.
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