Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: KLEBSON SILVA SANTOS
DATA: 16/12/2016
HORA: 15:00
LOCAL: Sala de Reunião do núcleo de Estudos em Sistemas Coloidais (NUESC) UNIT
TÍTULO: Extração sequencial por líquido pressurizado para obtenção de óleo e extratos de folhas de nim com potencial citotóxico contra o crescimento de células tumorais humanas.
PALAVRAS-CHAVES: Folhas de nim; Extração Sequencial; Alta Pressão; Atividade Antitumoral; Indução de Apoptose; Paragem Ciclo Celular.
PÁGINAS: 82
GRANDE ÁREA: Engenharias
ÁREA: Engenharia Química
SUBÁREA: Tecnologia Química
ESPECIALIDADE: Produtos Naturais
RESUMO:

RESUMO

O câncer é uma das mais comuns patologias causadora de morbidade e mortalidade na população mundial. Estudos estimativos indicam uma crescente progressão de novos casos e morte por câncer para as próximas décadas. Isso tem despertado a busca por tratamentos alternativos para o câncer a partir de plantas medicinais. Derivados da planta medicinal nim tem sido estudo ao longo do tempo devido as suas potenciais propriedades farmacológicas. Os seus compostos bioativos, tais como terpenos, flavonoides e fenólicos apresentam uma importante atividade para o controle e prevenção do câncer. Esses compostos bioativos podem ser extraídos pelo processo de extração por líquido pressurizado, que apresenta eficiência para obtenção dos compostos alvo, devido a sua elevada seletividade e permitir a utilização de solventes polares e apolares em uma única massa de matiz vegetal. O objetivo do presente estudo foi obter por um processo de extração líquido pressurizado óleo e extratos a partir de folhas de nim com a capacidade para inibir o crescimento de células de câncer humana. Assim, foi realizado um processo sequencial de extração líquido pressurizado usando os solventes hexano, acetato de etila e etanol (80%) em escala de polaridade. Em estudos preliminares usamos a temperaturas de 25 e 50 ºC, vazão de 1 e 2 mL/min usando os solventes em uma pressão isobárica de 100 bar. Além disso, foi realizada uma cinética de extração para encontrar a melhor condição massa de amostra em relação ao volume de solvente utilizado. As amostras foram caracterizadas por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada com um detector de espectrometria de massas com ionização por electrospray e outro detector com arranjo de fotodiodos. Os fenólicos totais e flavonoides totais foram mensurados por métodos espectrofotométricos. As propriedades antioxidantes foram espectrometricamente determinadas por ensaio de FRAP e DPPH. Além disso, também foi avaliada o crescimento de células cancerígenas HeLa, HepG2, MCF-7, NCI-H460 e TK6 e células não cancerígenas (PLP2) contra óleo e extratos de nim por métodos colorimétricos. Foram realizadas análises de citometria de fluxo para verificar a indução de apoptose e a distribuição das fases do ciclo celular das células TK6. Os resultados mostraram que o aumento da temperatura de 25 para 50 ºC aumenta o rendimento global de extração (hexano + acetato de etila + etanol) em cerca de 1%. Contudo, a diminuição da vazão de 2 mL/ min para 1 mL/mim aumentou significativamente o rendimento da extração. A cinética de extração mostra que 60 minutos de extração (60 mL de solvente) é o melhor tempo para extrair compostos do nim. A extração sequencial com uma pressão isobárica de 100 bar, fluxo de 1 mL/min e temperatura de 25 ºC teve um rendimento médio de 0.3677±0.012 % (hexano), 0.3138±0.0181 % (acetato de etila), 7.2323±0.1302 % (etanol 80%) e a não sequencial extração 7.1593±0.3350 % (etanol 80%). As análises cromatográficas sugerem uma similaridade entre os compostos obtidos com os solventes hexano, acetato de etila e etanol, contudo, o solvente acetato de etila parece extrair uma maior quantidade de terpenos e do composto rutina que os solventes hexano e etanol. A extração sequencial indica uma maior concentração de fenólicos totais e flavonoides totais para o extrato acetato de etila, comparado com as extrações usando hexano e etanol. O óleo e o extrato de nim apresentam potenciais efeitos antioxidantes através do poder de redução e eliminação de radicais livres. Os ensaios de citotoxicidade mostram que o óleo e os extratos obtidos são potencialmente capazes de inibir o crescimento de todas as linhagens de células cancerígenas testadas. O extrato sequencial obtido com acetado de etila é o mais eficiente agente antiproliferativo para as células tumorais humanas do que o óleo obtido com hexano e extrato etanólico respectivamente. Além disso, apresenta uma maior seletividade para as células cancerígenas comparado com as células não cancerígenas. Óleo e extrato de nim, ambos são capazes de induzir a apoptose e causar uma paragem na fase G1 do ciclo celular de células tumorais, esses mecanismos antitumorais causam danos genéticos nas células TK6 testadas.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CLAUDIO DARIVA
Externo à Instituição - ELTON FRANCESCHI
Externo ao Programa - 149.567.768-02 - JULIANA CORDEIRO CARDOSO
Presidente - 849.876.344-49 - RICARDO LUIZ CAVALCANTI DE ALBUQUERQUE JUNIOR