Banca de DEFESA: WANESSA LORDELO PEDREIRAS VIVAS
07/05/2015 16:21
Resumo
A Linfadenite Caseosa (LC) é uma doença crônica, infecto-contagiosa, ocasionada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis que acomete principalmente caprinos e ovinos, A profilaxia é e medida que apresenta o melhor custo-benefício, no entanto as vacinas disponíveis não são totalmente eficientes para o controle da LC, assim o desenvolvimento de novas vacinas é de extrema importância. O presente estudo teve por objetivo desenvolver vacina de DNA e de subunidade baseadas o gene cp40. Para isso o cp40 foi clonado no vetor de expressão em eucariotos pTARGET para obtenção da vacina de DNA e no vetor expressão em procariotos pAE para ontenção da proteina recombinante rCP40. Camundongos Balb/C fêmeas foram imunizados com 50 µg da vacina de subunidade (rCP40) associada ao adjuvante Hidróxido de Alumínio e adjuvante Incompleto de Freund e com 50 µg da vacina de DNA (pTAGET/cp40) e desafiados com 104UFC da cepa virulenta C. pseudotuberculosis MIC6. A resposta imune humoral foi avaliada através de ELISA Indireto e resposta imune celular pela quantificação de mRNA das citocinas IL-2, IL4, IL-10 e INF-gama por qRT-PCR. Os resultados demonstraram que a rCP40/Adj.In. Freund proporcionou uma melhor avaliação resposta imune humoral através da produção significativa de IgG2a quando comparado aos demais grupos experimentais (p<0,05), bem como promoveu uma resposta imune celular, através da expressão das Il-2 e INF-gama, consideradas moduladoras para o indução do tipo de resposta Th1, atuante na eliminação de C. pseudotuberculosis. A rCP40/Al(OH)3 e a rCP40/Adj.In.Freund também induziram uma produção de IgG1 (p<0,05). A vacina de DNA (pTARGET/cp40), apesar da expressão da proteína CP40 in vitro em células CHO, não induziu níveis significativos de isotipos IgG1 e IgG2a in vivo. Assim a possibilidade de novas formulações vacinais associando a rCP40 ao Adjuvante Incompleto de Freund, cepas atenuadas e mutantes da C. pseudotuberculosis, pode vir a caracterizar uma formulação de vacina promissora para o controle da Linfadenite Caseosa.
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