Banca de QUALIFICAÇÃO: WANESSA LORDELO PEDREIRAS VIVAS
15/04/2015 15:37
A Linfadenite Caseosa (LC) é uma doença crônica, infecto-contagiosa, que acomete principalmente caprinos e ovinos, ocasionada pela Corynebacterium pseudotuberculosis, classificada como uma bactéria gram-positiva e intracelular. Tendo em vista a grande e crescente importância socioeconômica da ovinocaprinocultura no Brasil e, contrariamente a este fato, a falta de uma vacina brasileira eficiente contra a LC, o presente estudo desenvolveu vacina de DNA contendo a sequência codificadora do gene cp40, expressou a proteína CP40 como vacina de subunidade recombinante. O gene cp40 foi clonado no vetor de expressão em eucariotos pTARGET e de expressão em procariotos pAE. A rCP40 foi purificada e avaliada como vacina recombinante associada ao Adjuvante Hidróxido de Alumínio e Adjuvante Incompleto de Freund. Avaliou-se a resposta imune humoral através de ELISA Indireto dos isotipos IgG1 e IgG2a e resposta imune celular pela quantificação de mRNA das citocinas IL-2, IL4, IL-10 e INF-gama por qRT-PCR. Os resultados demonstraram que a rCP40/Adj.In. Freund proporcionou uma melhor avaliação resposta imune humoral através da produção significativa de IgG2a quando comparado aos demais grupos experimentais(p<0,05), bem como promoveu uma resposta imune celular, através da expressão das Il-2 e INF-gama, consideradas moduladoras para o indução do tipo de resposta Th1, atuante na eliminação de C. pseudotuberculosis. A rCP40/Al(OH)3 e a rCP40/Adj.In.Freund também induziram uma produção de IgG1 (p<0,05). A vacina de DNA, apesar de níveis significativos de expressão in vitro em células CHO, não induziu níveis significativos de isotipos IgG1 e IgG2a in vivo. Assim a possibilidade de novas formulações vacinais associando a rCP40 ao Adjuvante Incompleto de Freund, cepas atenuadas e mutantes da C. pseudotuberculosis, pode vir a caracterizar uma formulação de vacina promissora para o controle da Linfadenite Caseosa.
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